Předúprava vzorku by měla zahrnovat všechny operace před injekcí. Kromě kroků, jako je vážení, rozpouštění a ředění, vzorek potřebuje: ① filtraci; ② extrakce; ③ derivatizace (předsloupcová derivatizace); ④ kapalinová chromatografie (nízkotlaká sloupcová chromatografie) )čekejte. Tyto operace lze provádět ručně nebo automaticky. Účelem předúpravy vzorku je odstranění interferencí, zvýšení citlivosti detektoru (obohacení), ochrana chromatografické kolony atd. Vzhledem k tomu, že některé vzorky nelze po předúpravě injektovat a analyzovat, je třeba je derivatizovat, aby některé složky bez UV absorpce nebo fluorescence mohly být detekován UV a fluorescenčními detektory po derivatizaci. To nejen zlepšuje citlivost, ale také zlepšuje rozlišení (změna hmoty). Předúprava vzorku také přináší některé problémy, jako je ztráta vzorku, kontaminace vzorku, neúplná derivatizační reakce nebo tvorba více reaktantů.
Problémy s extrakcí Účelem extrakce je oddělit složky, které mají být analyzovány, od společně rozpustného vzorkového média nebo omezit látky, které poškozují kolonu (jako jsou proteiny atd.) a interferují. Obecně se používá extrakce organickým rozpouštědlem. Rozpouštědlo použité pro extrakci musí mít nízkou toxicitu, dobrou těkavost, málo nečistot, dobrou rozpustnost vzorku, který má být testován, a je nemísitelné s vodou. Běžně používaná rozpouštědla zahrnují diethylether, ethylacetát, methylenchlorid, chloroform, benzen nebo směs dvou nebo více rozpouštědel. Po extrakci může být vzorek obecně injikován přímo. Někdy je nutné koncentrovat nebo sušit a koncentrovat a poté použít pevný objem kapalné nebo mobilní fáze k rozpuštění vzorku pro injekci. Tím se nejen zvýší koncentrace vzorku, ale také se zlepší citlivost, přičemž se zabrání interferenci píku rozpouštědla na píku vzorku. Při extrakci je třeba vzít v úvahu rozpustnost molekul vzorku. Kromě složek rozpustných v tucích a rozpustných ve vodě existují také složky rozpustné v tucích, které se používají k výrobě ve vodě rozpustných solí. Metoda extrakce je následující: Vzorky rozpustné ve vodě: 1. Metoda extrakce kyselých složek a vzniklých solí: Nečistoty se extrahují organickými rozpouštědly a poté se upraví Okyselí se a poté se přidá organické rozpouštědlo pro extrakci nebo injekci, nebo se vyfouká do sucha pod proudem N2, rozpustí jej ve vhodném rozpouštědle a poté vstříkne vzorek. 2. Metoda extrakce alkalických složek a vzniklých solí: Nečistoty se extrahují organickým rozpouštědlem a zalkalizují, poté se přidá organické rozpouštědlo pro extrakci nebo injekci, nebo se vysuší vyfoukáním pod proudem N2, rozpustí se ve vhodném rozpouštědle a poté se vstříkne vzorek . 3. Metoda extrakce neutrální složky: ① Po extrakci nečistot organickým rozpouštědlem analyzujte přímo chromatografií na reverzní fázi; ② Metoda extrakce složek rozpustných v tucích: extrakce nebo injekce organickým rozpouštědlem nebo sušení pod proudem N2 a použití vhodného rozpouštědla Po rozpuštění vstříkněte vzorek;
Problémy s kontaminací: Obecně platí, že testovací prostředí, nádoby a činidla jsou všechny faktory, které ovlivňují výsledky měření. 1. Znečištění prostředí Škodlivé plyny, roztoky plynů, prach atd. v přístrojové místnosti mohou způsobit znečištění a ovlivnit výsledky testu. Tento druh znečištění je obtížné napravit. Proto by měla být přístrojová místnost izolována od ostatních laboratoří a udržována v čistotě. V přístrojové místnosti by měla být instalována klimatizace. Poznámka: odolnost proti vlhkosti, antikorozní ochrana, nárazuvzdornost a relativní vlhkost vzduchu by měla být nižší než 70 %. 2. Běžně používané náčiní v kontejnerových laboratořích zahrnuje sklo, porcelán, křemen, plasty atd. Při provádění analýzy by náčiní mělo být vybráno podle požadavků zpracovávaného vzorku. Bez ohledu na použité nádobí musí být mycí lišta nádoby čistá. Všechny jsou velmi důležité a jsou také základní zárukou pro získání dobrých výsledků testů. 3. Činidla Při analýze kapalinovou chromatografií musí být vybraná činidla chromatograficky čistá, čistá nebo analyticky čistá. Pokud se použijí reagencie obsahující nečistoty, objeví se píky nečistot a ovlivní výsledky měření. Problémy se standardními roztoky: Při přípravě standardního roztoku musíte nejprve připravit roztok vnitřního standardu s aktuální koncentrací. Pro snížení chyb je nejlepší použít roztok vnitřního standardu připravený ve stejné šarži pro standardní roztok a roztok vzorku. 1. Látky použité k přípravě standardního roztoku by měly být chromatograficky čisté a stabilní. 2. Běžně používané standardní roztoky by měly být skladovány v hnědých lahvičkách s roztokem při nízké teplotě. 3. Při přípravě vitaminových standardů by měly být umístěny do hnědé odměrné baňky nebo chráněny před světlem, aby se zabránilo rozkladu.
souhrn
Stručně řečeno, pro analytické přístroje je nejdůležitějším způsobem, jak se vyhnout poruchám, správná obsluha a seřízení. Vyvarujte se provozu naslepo. Chcete-li omezit různé systémové chyby, věnujte pozornost výše uvedeným bodům a také každodenní údržbě přístroje a každodenní údržbě chromatografické kolony. udržujte přístrojovou místnost v čistotě, aby kapalinový chromatograf mohl být v optimálním provozním stavu a mohl hrát důležitou roli při analýze.